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新型冠狀病毒感染的肺炎的病毒檢測
發(fā)布日期:2020-01-29

  貓傳染性腹膜炎(FIP)是目前導(dǎo)致貓死亡的重要原因之一,從3個(gè)月到3齡貓以及大于10齡貓,特別是發(fā)生在那些純種貓和其它數(shù)量及種類繁多但養(yǎng)在一起的家養(yǎng)貓。貓冠狀病毒FeCV(Feline enteric Coronavirus)是高度傳染性病毒而且偏好發(fā)生在數(shù)量及種類繁多而且養(yǎng)在一起的家養(yǎng)貓。FeCV給貓帶來了極大的危險(xiǎn),F(xiàn)eCV陽性通常被認(rèn)為是FIP的前奏。要控制貓F(tuán)IP最根本的方法就是要做好FeCV的預(yù)防和控制。FeCV是廣泛的貓冠狀病毒Feline Coronavirus(FCoV)中的一種,F(xiàn)eCV抗體的存在僅表示有FeCV病毒存在和/或感染了FIP的可能性。對FeCV抗體呈陽性結(jié)果也不一定表示貓得到了FeCV病毒和/或感染了FIP,應(yīng)該要和其它臨床癥狀結(jié)合起來一齊判斷。但陰性結(jié)果可說明沒有FeCV病毒和/或感染了FIP。

  酶標(biāo)板的孔中包被有純化的冠狀病毒抗原。從金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus提取的蛋白A與HRP結(jié)合成復(fù)合物。血清或血漿樣品和蛋白A酶標(biāo)記物一起在酶標(biāo)板的孔中孵育。如果貓樣品里存在FCoV抗體,抗體將與孔中的抗原結(jié)合,再與蛋白A酶標(biāo)記物結(jié)合。多余的酶標(biāo)記蛋白A被洗掉,加入發(fā)色底物。清晰的藍(lán)色表示FCoV抗體存在,沒有顏色變化表明沒有FCoV抗體。該試劑盒具有高特異性和靈敏度,操作簡單,30分鐘內(nèi)可以知道結(jié)果。試劑盒里包括陽性質(zhì)控和陰性質(zhì)控,僅需肉眼通過與陰性質(zhì)控顏色進(jìn)行比較,就可以準(zhǔn)確地判斷樣品里FCoV抗體的存在。

  樣品

  需1ul血清或血漿,只能檢測貓的樣品。樣品可在2~8℃保存7天,如果需要更長的保存,樣品可保存在-20℃。嚴(yán)重紅細(xì)胞溶解或脂溶血會產(chǎn)生干擾的顏色,所以盡可能去得到更好質(zhì)量的樣品。

  準(zhǔn)備洗滌液

  讓洗滌濃縮液達(dá)到室溫,輕輕地倒置混勻。用蒸餾水或去離子水稀釋洗滌濃縮液(1份洗滌濃縮液加至9份水中),稀釋后的洗滌液可保存于2~7℃。

  結(jié)果

  a. 檢測的有效性必須是:陽性質(zhì)控孔里的液體呈清晰的藍(lán)色,而陰性質(zhì)控孔里的液體保持清澈。

  b. 假若樣品孔的顏色變化比陰性質(zhì)控孔深很多則表明,該動物以前或目前正受到FCoV感染,并且有可能通過排泄物傳播病毒。此時(shí)便需要與其它的臨床數(shù)據(jù)結(jié)合起來以確診FIP。

  c. 如果樣品孔里無顏色變化表明沒有感染FIP疾病。

  試劑盒組份以下內(nèi)容物包含在試劑盒里:包被好的酶標(biāo)板 8×12孔陽性質(zhì)控血清 1.5ml陰性質(zhì)控血清 7.0ml蛋白A HRP標(biāo)記物 5.0mlTMB 7.0ml底物緩沖液 7.0ml濃縮洗滌液 100.0ml

  注意事項(xiàng)

  *試劑盒使用前恢復(fù)至室溫(21~25℃)

  *不同樣品使用不同的加樣器頭

  *不要把試劑盒直接暴露在陽光下

  *不要使用過期的試劑或不同試劑盒里試劑一齊混雜使用

  *嚴(yán)格按照步驟操作,不適當(dāng)?shù)南礈旎蛟噭┪廴緦a(chǎn)生非專一性的顏色*僅限獸醫(yī)使用

  保存和穩(wěn)定性

  將試劑盒和稀釋的洗滌液保存于2~7℃,不要冷凍。只要在適當(dāng)保存條件下,試劑在有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。

 
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